Cuantificacion de niveles residuales de Danofloxacina en plasma y huevos de gallinas ponedoras

Abstract

Danofloxacina es un antimicrobiano de origen sintético incluido en el grupo de las fluoroquinolonas provisto de espectro antibacteriano orientado hacia microorganismos Gram negativos y micoplasmas, utilizado exclusivamente en animales domésticos. Este estudio se realizó con el propósito de estudiar la disposición temporal de danofloxacina en compartimentos del huevo luego de la administración en el agua de bebida de 7 35 mg/kg de danofloxacina durante 11 días consecutivos en gallinas de la línea genética ISA-Bovans Brown (N= 15), de 30- 35 semanas de edad, en pico de postura (85 ± 15 %, al inicio del ensayo) y peso promedio de 1.57 kg. Las aves fueron alojadas en jaulas individuales en condiciones de luz controladas de 17 horas totales, 21.2 ± 1.8° C de temperatura ambiente, agua y alimento balanceado ad libitum Concluida la administración, diariamente se colectaron huevos de cada animal e inmediatamente se separaron en clara y yema, identificaron por ave/día y almacenaron a -20° C hasta su análisis El ensayo preparativo consistió en la extracción líquido-líquido del analito utilizando 200 Id., de plasma, yema o clara, según corresponda, 200 lit de agua deionizada, 800 pti, de una solución de metanol: agua: ácido perclórico 50:50:2 v/v/v y 20 ja.1_, de una solución de 20 p.g/m1 de norfloxacina como estándar interno. El conjunto se sometió a agitación por vortex durante 30" y luego a centrifugado a 13500 rpm a 4°C durante 30'. La separación y cuantificación se realizó por HPLC mediante elusión isocrática en fase reversa utilizando columna C-18 y lectura en detector de fluorescencia establecido a 295 nm de excitación y 490 nm de emisión, fase móvil compuesta por agua, acetonitrilo y trietilamina (79:20:1 v/v/v) ajustada a pH 3. De acuerdo a las áreas de picos de concentraciones conocidas, se calcularon por regresión lineal simple las concentraciones de las muestras problema, utilizando la fórmula sugerida por Nouws & Ziv (1976). El antimicrobiano se cuantificó en el plasma al suspender la medicación, registrándose una concentración de 0.54 ± 0.18 pig/m1 a las 24 horas y de 0.046 ± 0.021 ig/m1 a las 48 horas, mientras que los niveles alcanzados con danofloxacina son superiores y más persistentes en la yema que en la clara, alcanzaron los 14.6 ± 0.6 y 8.7 ± 0.4 días, respectivamente. Las características de disposición observadas con danofloxacina son compatibles con las propiedades vii físico-químicas del antimicrobiano con los respectivos compartimentos del huevo y el tiempo requerido para su formación. La administración de fluoroquinolonas no está permitida en aves de postura aunque suelen aplicarse en presencia de enfermedades infectocontagiosas que amenacen la vida de los animales. Los datos obtenidos de depleción de danofloxacina en los compartimentos del huevo se analizaron mediante el programa WT 1.4 de la EMEA y conjeturando un riguroso LMR (0.001 pg/kg), se estimó un período de retiro de 23.94 y 27.59 días para clara y yema, respectivamente Palabras claves: danofloxacina, huevos, residuos.