Mecanismos involucrados en la migracion de tubulina a membrana plasmatica y la regulacion de actividad flipasa

Abstract

Las flipasas son translocasas de aminofosfolípidos que transportan fosfatidilserina (PS) y fosfatidiletanolamina (PE) desde la cara exoplásmica a la citoplasmática de la membrana plasmática (MP) en la mayoría de las células. Las flipasas son P-ATPasas de tipo IV, poseen una alta homología estructural con P-ATPasas de tipo II, tales como Na+/K+-ATPasa y Ca+2-ATPasa de MP, cuya actividad se encuentra regulada por tubulina, la sub-unidad constituyente de los microtúbulos. En este trabajo, se estudió la posible regulación de la actividad flipasa, específicamente la actividad de ATP11C (flipasa principal en eritrocitos humanos) por tubulina, fenómeno que afecta la asimetría de los fosfolípidos en la célula. Pudimos demostrar que, i) los eritrocitos de pacientes diabéticos e hipertensos, que contienen una mayor cantidad de tubulina de membrana, mostraron una menor capacidad para translocar la fosfatidilserina; ii) la modificación farmacológica del contenido de tubulina tanto en MP de células K562 como en eritrocitos se correlacionó con la translocación de PS, de manera que cuanto mayor es el contenido de tubulina en MP, menor es la translocación de PS y viceversa; iii) cuando vesículas invertidas de eritrocitos humanos se incubaron con tubulina, hubo una disminución en la translocación de PS dependiente de P-ATPasa; iv) se observó que en MPs de células HEK293T que sobreexpresaban ATP11C las señales de fluorescencia provenientes de tubulina y ATP11C se correlacionaban; y v) cuando se modificaron farmacológicamente los contenidos de tubulina en células HEK273T que sobreexpresaban ATP11C y se calcularon los coeficientes de Pearson, los valores indicaron que colocalizaban en MP. Estos resultados sugieren que la tubulina estaría implicada en la regulación de la asimetría de los fosfolípidos de MP inhibiendo actividad de flipasas.