Efectos del plasma rico en factores de crecimiento (PRFC) y plasma rico en plaquetas (PRP) en la regeneracion de tejidos blandos

Abstract

Los defectos extensos de piel producidos por traumatismos, anormalidades congénitas o neoplasias sepueden tratar mediante incisiones de relajación, plastias o colgajos. La generación de concentradosplasmáticos de plaquetas tiene como finalidad la liberación de factores de crecimiento sostenida en eltiempo. En medicina veterinaria su potencial aplicación tiene una limitada evidencia clínica de susefectos y variabilidad en la preparación de los concentrados. En este trabajo se evaluaron los efectosdiferenciales de la aplicación de Plasma Rico en Plaquetas (PRP) y el Plasma Rico en Factores deCrecimiento (PRFC) en la cicatrización de heridas provocadas por colgajos cutáneos en conejos. En laexperiencia in vitro los concentrados plaquetarios se obtuvieron por centrifugación diferencial desangre venosa autóloga, PRP (1200 rpm, 10 minutos/ 2000 rpm, 10 minutos) y PRFC (1800 rpm, 8minutos). En las experiencias in vivo se utilizó un total de 36 conejos albinos neozelandeses(Oryctolagus Cuniculi) machos y hembras sanos. Se dividieron en 3 grupos de 12 conejos cada uno yse sometieron a procedimiento quirúrgico. En los grupos 1, 2 y 3 se realizaron dos colgajos cutáneos,derecho e izquierdo. En cada lecho se aplicaron los tratamientos PRP vs. NaCl 0,9% (control), PRFCvs. NaCl 0,9%y PRP vs. PRFC, respectivamente. Durante 30 días se realizaron observacionesmacroscópicas de las heridas y su evolución se evaluó considerando integridad de la piel, aspecto de lacicatriz, rubor, exudado y edema. Se realizaron observaciones microscópicas de biopsias de piel, quese procesaron para microscopia óptica, a los 3, 5, 7, 15 y 30 días postquirúrgicos empleando diferentestinciones (H/E, PAS y Tricrómica de Masson). Además se complementó el análisis de las biopsiascon estudios ultraestructurales por microscopia electrónica de transmisión (MET). Mediantemarcación inmunohistoquímica se determinó la expresión del factor de crecimiento endotelial vascular(FCEV) en las muestras de piel para cada día de biopsia. Los datos cualitativos y cuantitativosobtenidos se analizaron estadísticamente mediante pruebas no paramétricas como test de Wilcoxon yel test de Fisher LSD para las diferencias entre medias (p<0.05). En el PRP se obtuvo 3,5 veces másplaquetas que el contaje plaquetario de sangre periférica y para el PRFC 2,6 veces más. Por MET sedemostró la integridad plaquetaria en los dos preparados. Basados en las observacionesmacroscópicas, todos los colgajos de los grupos de conejos tratados con PRC y PRFC presentaronresultados promisorios respecto a la integridad de la piel y aceptable aspecto de cicatriz encomparación con los controles. En los colgajos tratados la presencia de exudado fueproporcionalmente menor respecto a los controles durante el periodo de ensayo (30 días). A los 7 y 15días la intensidad del rubor fue significativamente mayor en los colgajos tratados que en los controles(p<0,05). En la variable edema no hubo diferencias significativas entre los colgajos tratados y notratados (p>0,05). En el análisis microscópico de las biopsias de piel, la evaluación cualitativa de lasvariables proliferación vascular, células mononucleares, proliferación de fibroblastos y re-epitelización fue significativamente mayor en los tratados respecto a los controles en todo el periodode estudio. Es de destacar que en los colgajos tratados con cada concentrado plaquetario (PRP oPRFC), la producción de colágeno se incrementó notablemente en comparación a los controles a los30 días (p< 0.05). Respecto a la proliferación de polimorfonucleares no se hallaron diferenciassignificativas entre los colgajos (p>0,05). En relación a la cuantificación de fibroblastos, fibrocitos yvasos sanguíneos se obtuvieron diferencias significativas entre los colgajos tratados con PRP y PRFCdurante los 30 días de estudio (p< 0,05). De este modo se evidencio que el tratamiento con PRFCresulto ser el de mayor estimulo sobre la proliferación de estas células y el aumento en el número devasos sanguíneos en comparación a los resultados hallados con PRP. En el análisis ultraestructural porMET de las biopsias de piel se observó que el PRP inició más rápidamente la fase de remodelacióncelular en comparación con el tratamiento con PRFC y los controles. Sin embargo los tratamientoscon PRFC de los colgajos de piel mostraron una mayor actividad fibroblástica. Se observó mejororganización estructural del colágeno con los tratamientos PRP y PRFC respecto a los controles. Enlos tratados con PRP se demostró antes la presencia del VEGF. Los resultados obtenidos infieren queel empleo de PRP y PRFC en forma local en cirugía reconstructiva promueve una respuestasatisfactoria en la fibroplasia y la angiogénesis, en consecuencia favorecen la cicatrización de colgajoscutáneos en conejos.