Caracterizacion de pseudomonas bioantagonistas con perspectivas de aplicacion para el control fitosanitario de hortalizas

Abstract

Los cultivos hortícolas son crecidos y consumidos en todo el mundo y proveen unafuente de nutrientes y fibra para la dieta humana. Las enfermedades son obstáculos importantespara la producción de cultivos hortícolas y numerosos patógenos pueden infectar a dichasplantas. Entre ellas, las enfermedades fúngícas son uno de los principales factores que limitan laproducción. El control biológico ofrece una alternativa o suplemento a los agroquímicos para elmanejo de enfermedades vegetales, sin el impacto negativo del control químico Pseudomonas spp. son bacterias comunes del suelo que se cultivan fácilmente a partirde la mayoría de los suelos agrícolas y de la rizósfera de las plantas. Se las ha estudiado endetalle debido a su versatilidad catabólica, su habilidad para colonizar sistemas raciiculares, suadaptación a estreses ambientales y a su capacidad para competir agresivamente con otrosmicroorganismos, inducir mecanismos de defensa en las plantas y producir un amplio rango demetabolitos antifinigicos como 2,4-diacetilfloroglucinol (DAPG), pioluteorina (PLT),pirrolnitrina (PRN), sideróforos, compuestos volátiles y enzimas hidrolíticas En el presente trabajo de tesis, se aislaron Pseudomonas spp. fluorescentes a partir desuelo rizosférico de plantas sanas de tomate y pimiento. Dichos aislamientos se caracterizaronen base a características bioquímicas y genotípicas. Mediante ensayos de antagonismo porcultivo dual en placas de Petri, se estudió el efecto inhibitorio de los aislamientos sobre lagerminación y el desarrollo miceliar de Sclerotium rollSii, Alternaria alternata, Fusarium solaniy E verticillioides. También se probó el efecto del agregado de diferentes concentraciones dehierro (FeCl3) sobre la actividad antagónica contra A. alternata. Por otra parte, se determinó lacapacidad de solubilizar fosfatos y producir sideróforos, enzimas hidrolíticas, ácido indolacético (AIA) y cianuro de hidrógeno. Luego de los ensayos in vitro, se seleccionó una cepa delgénero Pseudomonas, denominada PCI2, como agente potencial para controlar el damping-off yel tizón foliar de tomate causados por los hongos patógenos S. rolfsii y A. alternata,respectivamente. PCI2 se identificó a nivel de género mediante el análisis de la secuenciaparcial del gen 16S rDNA, determinándose además, su relación filogenética con especies dePseudomonas previamente caracterizadas. Se llevaron a cabo ensayos de PCR para detectargenes involucrados en la producción de compuestos antifúngicos en Pseudomonas sp. PCI2 Finalmente, se cuantificó la producción de sideróforos en el sobrenadante de cultivo de PC12 Todos los aislamientos inhibieron significativamente a A. alternata, particularmente enmedio TS A al 25%. El efecto antagónico sobre S. rolfsii y F. solani resultó más marcado enmedio King B. Por el contrario, los aislamientos no ejercieron una marcada inhibición sobre F verticillioides. El 30% de los aislamientos evidenció producción de proteasa. Sin embargo,ninguno produjo celulasa. Sólo Pseudomonas sp. PCI2 resultó positiva para la producción dequitinasa. PCI2 se agrupó con la especie P. putida. Los ensayos de control biológico con S rolfsii como patógeno blanco resultaron en incrementos significativos en el porcentaje deplantas paradas (29%) y en peso seco radicular (58%). En los ensayos in vivo contra A alternata, Pseudomonas sp. PCI2 redujo el porcentaje de plantas de tomate enfermas en un 20%e incrementó el peso seco aéreo en un 65%. Finalmente, la cepa PCI2 produjo un 45% deunidades de sideróforos. Los resultados sugieren que Pseudomonas sp. PCI2 podría contribuiren la protección de plantas de tomate contra el damping-off causado por S. rolfsii y el tizónfoliar causado por A. alternata.