Determinacion y caracterizacion de la neteritis proliferativa porcina en criaderos confinados de la Argentina

Abstract

La Enteropatía Proliferativa Porcina (EPP) o Ileítis es considerada pornumerosos investigadores como una de las principales enfermedades transmisibles enla producción confinada de cerdos en todo el mundo. Producida por Lawsoniaintracellularis (Li), una bacteria Gram (-), bacilo pequeño, móvil, intracelular obligadocurvo o recto (Lawson y cols, 1993; McOrist y cols, 1994; Lawson y cols, 2000; McOristy Gebhart, 2005), que manifiesta como principales signos clínicos anorexia, diarrea,retardo en el crecimiento e incremento en la mortalidad de cerdos en la etapa determinación (Lawson y Gebhart, 2000; Jensen y cols, 2006) La distribución de esta enfermedad es mundial y en algunos países elporcentaje de establecimientos afectados por Ileítis supera al 90% (McOrist y cols,2003; McOrist y cols, 2006). Estudios serológicos han demostrado que la prevalenciade EPP en criaderos van del 60 al 90% en diferentes países de todo el mundo(Guedes, 2004) Es una patología que afecta principalmente al intestino delgado, en particular alileon en su parte terminal, y a veces, al ciego y al colon. La mucosa alterada por EPPse caracteriza por encontrarse engrosada y arrugada, producto de la proliferaciónadenomatosa de las células epiteliales inmaduras de las criptas infectadas por U(Lawson y Gebhart, 2000; Jacobson y cols, 2003; Rodríguez y cols, 2004) En los últimos años la consideraron a Li como el agente causal de hiperplasiaen intestino, en numerosas especies de mamíferos y aves. Además de producir laenfermedad en cerdos, se ha comunicado su presencia en hamsters, equinos (Lawsony Gebhart 2000; Franga, 2007), ratones y macacos en cautiverio (Smith y cols 2000;Klein y cols, 1999) y se ha sugerido también como agente de la colitis ulcerosa enseres humanos, estudios en curso (Pitcher y cols en Smith y cols, 2000) La EPP se manifiesta de dos formas en las granjas infectadas: en una formacrónica, con tres cuadros lesionales macroscópicos bien diferenciados, laadenomatosis intestinal, la enteritis necrótica y la ileítis regional; y en una forma aguda,la Enteropatía proliferativa hemorrágica (McOrist y Gebhart, 1999). Si bien estasMV. Judith Martina Bertone 11formas mantienen la misma lesión de base, son muy diferentes en sus manifestacionesclínicas (Carvajal y cols, 2005). Algunos autores agregan una forma más depresentación, a la que denominan subclínica (McOrist, 2006), sin los signos típicos dediarrea, pero afirman que desde el punto de vista de los parámetros productivos, estaenfermedad no debería pasar inavertido Debido a que es una bacteria que no crece en medios convencionales "in vitro"en ausencia de enterocitos, tanto el aislamiento como el diagnóstico serológico resultancomplicados ya que la respuesta humoral que se produce es variable y corta (Huerta ycols, 2003). Tanto el cuadro clínico como la observación de las lesiones macroscópicasson insuficientes para el diagnóstico certero de EPP, por lo que se recomienda undiagnóstico laboratorial, pudiendo ser directo o indirecto (Lawson y cols, 2000; Carvajaly cols, 2005). En función del incremento de casos de ileítis en la casuística de nuestroDepartamento y su reciente asociación con otras entidades como Circovirus Porcinotipo 2 (PCV-2) (Jensen y cols, 2006; Machuca y cols, 2008); nos propusimos estableceruna rutina de diagnóstico confiable y económica para ser aplicada en el servicio dediagnóstico histopatológico que brinda el Departamento de Patología Animal de laFacultad de Veterinaria Este trabajo se realizó en el marco de un proyecto de investigación denominado"Caracterización Patológica, Macro y Microscópica de Diarreas en Cerdos Confinadosde 8 a 22 Semanas de Edad" iniciado el año 2007, en el marco de un Programa de AltaSalud para el Mejoramiento de la Calidad del Producto en Establecimientos Porcinos,que incluyó el estudio de varias entidades patológicas productoras de diarrea, comoBrachyspira spp. y Criptosporidium spp En el presente trabajo se exponen los resultados de una investigación cuyoobjetivo general ha sido el de determinar la presencia de Li, caracterizar las lesionesmacroscópicas y microscópicas mediante diferentes técnicas de diagnóstico la EPP enlos criaderos confinados, en cerdos con diarrea. El estudio se realizó sobre un total deMV. Judith Martina Bertone 1221 establecimientos intensivos pertenecientes a ocho provincias de la RepúblicaArgentina Se realizó un muestreo no probabilístico de conveniencia (Thrusfield, 1990)dirigido en cada establecimiento, a 3 animales de entre 8 y 21 semanas de edad, condiarrea y con disminución de su condición general, presentaran o no lesiones anátomo-patológicas compatibles con EPP en íleon, a 10 cm por delante de la válvula ileocecal El muestreo incluyó: necropsia, observación de las lesiones macroscópicas presentes,determinación color y de la consistencia, protocolización y toma de muestras de tejido yde materia fecal, sobre un total de 61 cerdos. Las técnicas empleadas en mucosaintestinal incluyeron Hematoxilina Eosina (H/E), Warthin Starry (WS),lnmunoperoxidasa (IPX), PCR y Microscopía electrónica (ME); y en materia fecal, PCR La discusión y los resultados se presentan en forma conjunta para cada uno delos ítems analizados, con el fin de facilitar su comprensión. En los resultados obtenidosse demuestra que las lesiones macroscópicas en general, no pueden ser utilizadascomo únicas herramientas de diagnóstico. Mientras que los estudios microscópicossirven para diagnósticar presuntivamente la EPP. La respuesta inflamatoria secaracteriza por la presencia de células inflamatorias de tipo mononuclear, de célulasgigantes e histiocitos en lámina propia del íleon distal, depleción linfoidea en folículosde Placas de Peyer, abscesos criptales y linfocitos intraepiteliales infiltrados entre losenterocitos hiperplásicos de las criptas de la mucosa ileal La constatación del aumento de tamaño del íleon, de los linfonódulos y de laslesiones microscópicas proliferativas típicas, es una herramienta confiable a la hora decaracterizar la EPP, cuando es utilizada en forma conjunta en el examen post mortem La técnica de WS resultó ser rápida y simple en su desarrollo y permitió identificar,además del agente etiológico, estructuras histológicas, patológicas y la respuestacelular. Por otro lado la técnica de IPX fue la prueba de oro para el diagnósticohistopatológico de Li, y permitió identificar diferentes etapas en la patogenia de laenfermedad (incluyendo los animales en recuperación) y grado de infección. Además,MV. Judith Martina Bertone 13permitió determinar la asociación entre la presencia de la bacteria, las lesionesmacroscópicas y las lesiones proliferativas microscópicas. La técnica de POR demucosa ileal permitió identificar animales con poca cantidad de Li en mucosa y suasociación con las lesiones, de donde se concluye que su aplicación podría ayudar adeterminar infecciones subclínicas. La técnica de PCR de materia fecal por su parte diolugar a la identificación de cerdos siguieron eliminando bacterias de maneraintermitente por varias semanas. Por último, la ME permitió identificar animales consignos de recuperación con enterocitos con numerosos cuerpos apoptóticos, sinmicrovellosidades, sin Li en su interior y con macrófagos en la luz glandular