Estudio de la regulacion de la expresion del gen regulatorio sae en Staphylococcus aureus

Abstract

Staphylococcus aureus es un agente causante de infecciones, tanto en el hombre como en los animales. La patogenicidad de S. aureus está dada por un gran número de proteínas extracelulares y unidas a la superficie bacteriana, las cuales se expresan coordinadamente, evidenciando la existencia de sistemas regulatorios globales. Estos sistemas regulan la expresión de genes de virulencia en respuesta a la densidad celular y a distintas condiciones ambientales y pueden ser divididos en: sistemas regulatorios de dos componentes, tales como agrCA, saeRS, lytRS, ar1RS, srrAB e yycFG; sistemas regulatorios mediados por proteínas homólogas a SarA y un factor sigma alternativo El sistema regulatorio sae consiste en dos genes, saeR y saeS, los cuales regulan a nivel trancripcional la expresión de varios factores de virulencia. Análisis transcripcionales revelaron la síntesis de un co-transcripto, de 2.4 kb, durante las fases de crecimiento post- exponencial tardía y estacionaria temprana, cuya expresión se encuentra disminuida en la mutante agr, indicando que agr es un regulador positivo de sae. Estudios previos habrían descripto dos promotores del locus sae, uno localizado 626 nt río arriba saeRS, y otro, 83 nt río arriba El objetivo del presente trabajo fue avanzar en el estudio del sistema regulatorio saeRS, en cuanto a su organización molecular y a su expresión bajo diferentes condiciones ambientales. Con este propósito, se obtuvieron construcciones plasmídicas y se llevaron a cabo estudios de complementación y de expresión del locus sae Los ensayos de complementación efectuados en la mutante sae permitieron demostrar que el plásmido portador de los genes saeRS más 406 pb río arriba restablece el fenotipo salvaje, indicando la presencia de un tercer promotor Los estudios de fusiones transcripcionales con distintos fragmentos de la región promotora del locus sae mostraron niveles diferentes de expresión, corroborando la existencia de varios promotores La expresión del locus sae se vió modificada por cambios en el medioambiente, incluso bajo condiciones que no afectan al gen regulatorio agr, lo que permitiría inferir el efecto de algunos factores ambientales directamente sobre sae, independientemente de agr.