Analisis epidemiologico y molecular de cepas de Staphylococcus aureus de distintos origenes
Abstract
Staphylococcus aureus es un agente causal de infecciones en hombre y animales,aunque su nicho ecológico es la flora normal de piel y mucosas de animales. El Objetivo delpresente trabajo fue el estudio epidemiológico molecular en base a las relaciones genéticasde 212 cepas de S. aureus aisladas de diferentes orígenes (alimentos, mastitis bovina,infecciones y flora normal de humanos) por RAPD-PCR y REP-PCR y su comparación conlos resultados obtenidos por técnicas convencionales. El 45% de todas las cepas pudieronasociarse con un biotipo huésped específico. La mayor resistencia a antibióticos encontradafue para penicilina (45%). Los resultados obtenidos mediante las técnicas moleculares deRAPD-PCR y REP-PCR permitieron diferenciar poblaciones genotípicamente diferentes deacuerdo al origen. Los ensayos con mezclas de ADN permitieron la obtención de bandasfuertes y nítidas diferentes en cada población y diferentes según la virulencia de las cepasensayadas. El análisis en la distribución de genes asociados a virulencia permitió analizar elestudio de estas diferencias genéticas. La amplificación de la región variable X del gen spaAreveló diferencias en el tamaño del fragmento para las cepas humanas y bovinas. El gencap5 estuvo presente en cepas humanas y bovinas, mientras que cap8 no pudo ser halladoen cepas bovinas. Se encontraron diferentes clases de agr entre las cepas aisladas dediferentes orígenes, sugiriendo la existencia de polimorfismos en las cepas de S. aureus deacuerdo al origen de aislamiento. Los resultados obtenidos al amplificar el gen saemuestran que solo el 62% de las cepas ensayadas presentaron fragmentos deamplificación. Los datos estarían indicando que el gen sae no se encuentra en todas lascepas ensayadas, o que podría ser polimórfico, por lo que no sería amplificable con loscebadores empleados. En el presente estudio todas las técnicas empleadas arrojaronbuenos resultados y en general los datos obtenidos de cada técnica fueron acordes entre sí
Los resultados obtenidos a partir de los genotipos podrían ser importantes para construirbases de datos. Esto permitiría monitorear las cepas de S. aureus. Los resultados obtenidosrepresentan un valioso aporte al conocimiento de la epidemiología de S. aureus ya que (1)han permitido elucidar relaciones epidemiológicas, (2) contribuyen a la selección de cepasde S. aureus con características relevantes para ser utilizadas en el diseño de vacunascontra la mastitis bovina, (3) posibilitan un mejor conocimiento, a nivel feno y genotípico decepas de S. aureus de distintos orígenes y de distintas regiones, (4) contribuyen al estudiode cepas MRSA, gen sae, análisis de las bandas posibles marcadores moleculares, loscuales podrían ser de utilidad en esquemas de identificación de cepas de S. aureusmediante métodos rápidos.
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- Tesis de Doctorado [306]